一文读懂什么是支原体清除剂
支原体清除剂的主要成分为抗菌肽(AMPs)+穿膜肽(CPPs),主要用于清除细胞、血清、培养基中的支原体,同时对常见的细菌也有一定的清除作用。其作用原理是支原体清除剂中的AMPs可以有效杀灭细胞外面的支原体和常见细菌,而CPPs可以携带AMPs进入细胞,清除细胞体内的支原体。
支原体清除剂属于新一代杀菌抗生素,可用于细胞培养中支原体污染的清除。同时能以较低的浓度发挥广谱的抗革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的作用,譬如能作用于耐青霉素与链霉素的细菌,已证实其对真核细胞无毒性。
支原体清除剂包含两种杀菌成份,即大环内脂类和喹诺酮类物质。大环内酯能结合细菌50S核糖体亚基,从而抑制蛋白质合成,喹诺酮则抑制细菌DNA消旋酶的活性。因此可以在细菌DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制细菌生长,明显增强除菌效果。这两个靶点在真核细胞内都不存在,所以本产品对真核细胞无毒。将本产品作用浓度加高5倍,对细胞没有明显的影响。在更高的浓度下,细胞的生长速率会出现下降,这是由于线粒体呼吸受到抑制的缘故,去除本产品后细胞生长速度即可恢复正常。
支原体清除剂优势:
简单——只需要简单的将试剂加入到培养基中。
通用——MycoZap试剂可以用来去除细胞培养中柔膜体纲的污染,包括支原体,无胆甾原体,植物花螺原体和虫原体。
彻底——抗生素和反新陈代谢试剂的结合使用,保证了污染去除的彻底性。
完全——该试剂盒包含所需要的全部试剂。
支原体清除剂使用方法:
1、 使用前确保瓶盖密封,解冻至室温,轻轻漩涡混匀并用 70%酒精擦拭瓶子表面后再放到超净工作台 上,以避免带入杂菌污染细胞及相关培养物质。
2、 按照以下步骤处理细胞:a. 受污染的细胞分盘后,以 1:1000 的比例加入支原体清除试剂,也就是 每 10ml 培养基中需加入 10?l 支原体清除试剂,然后与细胞一起培养 7 天,期间如换液时需按同等比例加入 支原体清除试剂。处理 7 天之后,换成不含支原体清除试剂的培养液培养 1-2 天,然后取 10 uL 细胞培养上清 液进行支原体的检测,以查看清除的效果。