基因导入仪是怎样进行工作的?

admin1年前 (2022-05-31)操作使用57

基因导入仪是生物领域研究中的一种常用的仪器。该设备整机一体化设计,操作简单,显示直观,微处理器控制的脉冲放电采用人机对话界面,操作简单、直观、细化了电容、电阻的设定范围,使细胞的电穿孔实验在相关条件下有了更广泛的选择。广泛应用于各种动物、植物细胞和微生物的电穿孔,也可作细胞杂交、融合、基因导入的研究。

基因导入仪的工作原理:

采用细胞电转染(电转)的原理,也叫细胞电穿孔(electroporation),是把外源大分子物质DNA、RNA、siRNA、蛋白质等以及一些小分子导入细胞膜内部的重要方法。在瞬间强大电场的作用下,溶液中细胞的细胞膜具有了一定的通透性,带电的外源物质以类似电泳的方式进入细胞膜。由于细胞膜磷脂双分子层的电阻很大,细胞外部电流场产生的细胞两极电压都被细胞膜承受,细胞质内分到的电压可以忽略不计,细胞质内部几乎没有电流,因此也决定了正常范围内的电转过程中细胞毒性很小。电场使DNA等物质进入细胞膜后只能停止在细胞膜附近,随后细胞本身的机制可以允许这些物质到细胞核等处。由于电转技术依靠的是物理方法,细胞表面的分子特性对电转影响比较小。相比化学转染方法和病毒载体转染方法,电转可以用在所有的细胞种类上,而且容易定量控制。

仪器若长期末使用在重新使用时,应先低压充电、放电,逐步升高电压,直至额定值。在仪器使用时,应先通电予热10 -15min设置数据,进行几次充电放电空操作后才可正式进行导入操作。

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