RAW 264.7 (小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)是及难转染，以前各位科研工作者都是用病毒感染或电转，以下是高效率转染的荧光图片分享。

使用第三代高分子材料转染试剂，美国ZetaLife Advanced Transfection Reagent。

一、转染步骤：

1、质粒提取：使用无内毒素提取试剂盒

2、质粒溶解：溶于超纯水或双蒸水，不能溶于试剂盒Buffer等其他试剂

3、质粒荧光：若质粒不带荧光、请使用荧光对照，方便查看转染效率

4、质粒浓度：500-600ng/ul

5、质粒和转染试剂复合物制备：质粒8ug和转染试剂8ul，吹打混匀室温静置15分钟，无需也不能另外加入任何试剂稀释

6、细胞转染前状态：拍照片留存

7、贴壁细胞铺板：6孔板完全培养基2ml、培养基中不加双抗，细胞密度：60%左右

8、转染：将复合物加入轻摇混匀、培养箱培养

9、换液：转染24小时后培养基换液

10、转染效率：转染48小时后拍荧光照片，查看转染效率

11、转染后细胞状态：拍明场细胞状态照片

12、检测：总计转染48小时后提取RNA或蛋白检测

上海转染生物科技有限公司是服务于高校和科研院所生命科学研究、生物医药研发、生物制品生产、基因和细胞治疗等领域高科技生物技术企业。提供的第三代高分子、细胞内可代谢的转染试剂，解决了难转染细胞转染效率低、脂质体转染毒性大致细胞死亡多、需要无血清环境的这些问题，比如：RAW264.7、THP-1、精原干细胞、IPS细胞、BMDM、MT-4人淋巴T细胞、SW480、A549、U87细胞等；提供的活体动物可代谢体内转染试剂，可转染长片段质粒DNA至体内 可通过静脉注射或体内局部组织注射的简单方式完成转染过程; 提供的无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物制品生产公司提供无血清的细胞规模生产支持；提供以植物生物为平台基因序列人源化、细胞培养可分解的3D基质胶产品；提供内毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品等。

美国Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的第三代高分子转染试剂，此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。

美国Biozellen（比丽）团队提供3D细胞/类器官培养基质胶产品：Biozellen 3D细胞培养基质胶套装、Biozellen 3D类器官培养基质胶套装，此产品为植物源、人源化氨基酸序列基质胶、培养终止后基质胶可以被温和溶解并维持3D细胞/类器官完整性的三维结构。产品性能稳定可4度保存2年。Biozellen鼠尾胶原蛋白Ⅰ型产品內毒素≦ 1.0 EU/mL，纯度≧95%，本产品用于在组织培养板上包被薄层涂层，以促进附着依赖于固定物的细胞附着；本品能用于制作3-D凝胶； Biozellen鼠尾胶原蛋白Ⅰ型产品可作为细胞培养的附着基质，与成肌细胞、脊髓神经节、肝细胞、胚胎肺、心脏外植体、成纤维细胞、内皮细胞、胰岛细胞一起在I型胶原的膜或凝胶上成功培养；Biozellen鼠尾胶原蛋白Ⅰ型产品也可用于特发性肺纤维化(IPF)的研究，研究内质网应激IPF对肺成纤维细胞的影响。 酸性溶液中的胶原蛋白可以产生三维支架，用于生物工程和细胞培养。本产品含有特殊的0.01N盐酸可4度保存2年。美国Biozellen（比丽）团队也可提供生命科学基础研究与转化研究的主要领域抗体产品包括：肿瘤、炎症、内分泌、干细胞等，我们承诺为客户提供可靠的试剂并推动生命科学研究。