使用薄层色谱要注意哪些事项(薄层色谱法的操作要点及注意事项)

admin1年前 (2022-06-04)操作使用37

薄层色谱兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,将样品点成一条线,则可分离多达500mg的样品。因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。

薄层色谱是在被洗涤干净的玻板上均匀的涂一层吸附剂或支持剂,待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上,晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。

薄层色谱的使用注意事项

1、因为是干板,铺板时手要平稳,否则容易不均匀。

2、点样时几个样点要在一条直线上,大小要合适(斑点直径一般不超过2mm),间距5~6mm。

3、点样用的毛细管不能交叉使用。

4、因溶液太稀,一次点样如果不够需重复点样,则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点,以防样点过大,造成拖尾、扩散等现象,影响分离效果。

5、点样结束待样点干燥后,方可进行展开。点样要轻,不可刺破薄层。

6﹑放板时手要平稳,否则走出斜线。

制备薄层板所需的仪器与试剂

烧杯(50mL)、载玻片、玻璃棒、1﹪羧甲基纤维素钠(CMC)水溶液、硅胶G、去离子水

注意要点:

1)室内温度,尤其不能太潮湿

2)硅胶和水的比例要合适:2.5-4.5最佳.根据自己点样的粘稠度调节

3)研磨,均匀,耐心,不要怕花时间

4)活化,注意在活化过程中不要受干扰

5)研磨要细、调和均匀,铺板要注意避免气泡、厚薄均匀。

相关文章

发表评论

访客

◎欢迎参与讨论,请在这里发表您的看法和观点。