大鼠胰腺星状细胞细胞说明书(小鼠胰岛细胞提取)

admin1年前 (2022-06-05)操作使用59

大鼠胰腺星状细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理。一.大鼠胰腺星状细胞贴壁细胞客户接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。显微镜观察细胞,当细胞融汇80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。严格无菌操作,打开细胞培养瓶。将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。用PBS2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。二.大鼠胰腺星状细胞悬浮细胞1.接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。2.肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。5.1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2培养

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